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免疫和腫瘤胞測定及分選中的應用

更新時間:2016-08-08點擊次數:1403

免疫和腫瘤胞測定及分選中的應用

   細胞分選是FCM技術一項特殊的功能,在免疫研究及臨床應用上占有重要地位。它的主要作用一是分選,二是鑒定,而分選又必須同鑒定結合進行。只要有相應的熒光標記,就可以分離出任何所需要的細胞群體,尤其是含量但對鑒定又非常主要的細胞,純度可達95%以上。

細胞周期中靜止期細胞的分離R.Schwarting等制備一株抗核抗原的單克隆抗體Ki-67,它同細胞周期中G1、S、G2M期 所有具增殖性的細胞結合,但不同G0期細胞反應,這樣就可以用分選技術把靜止期細胞分離出來。

人外周血嗜堿細胞的分離  IgE介導嗜堿細胞釋放組織胺和其他介質,是介導I型超敏反應的特定標志,但白細胞中的嗜堿細胞濃度極低,阻礙了這一研究。用抗鼠IgE單克隆抗體同FITC結合物染色技術,即可通過分選方法把嗜堿細胞分離出來,2小時可收集細胞4×105,活存88%以上。

外周血中變異紅細胞的鑒定  這是分選技術同顯微鏡結合的鑒定、監測手段。它可成功地來定量在正常個體血細胞內檢查出含突變的血紅蛋白的紅細胞,也可以監督暴露于致突變原的環境工作人員含突變紅細胞個體的背景,檢出敏感性可達3×10-5細胞。

從母體循環中分離出胎兒細胞  其原理是用YDNA探針,HLA-A特異單克隆抗體,Rh因子血清等染色及胞/核比例,細胞大小,核大小及光散射等特點在母體中找出非母體細胞標記,即可鑒定出胎兒細胞。這種技術的推廣應用,可以減少母體懷孕期間羊膜穿刺或滋氧層穿刺帶來的危險。

分選技術也存在著某些技術不足,如分離速度、產量受限;分選中由于管道、濾材等因素使得大細胞或有粘附性細胞受到限制性的選擇。目前,細胞標記藥品及方法,也會不同程度影響細胞質量。隨著新技術的應用,這些問題會得到滿意地解決。

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