產品簡介：

斐林試劑(Fehling's Reagent)又稱菲林試劑或裴林試劑，是德國化學家Hermann von Fehling 1849年所發明，與班氏試劑(Benedict's Reagent)相似，均是用來檢測還原糖的存在，其原理是與可溶性的還原性糖(葡萄糖、果糖和麥芽糖)在加熱的條件下，能夠生成磚紅色的氧化亞銅沉淀。

   斐林試劑(GB/T  5009.7-2016)是根據國家標準(食品中還原糖的測定)推薦的直接滴定的方法，主要由酒石酸鈉鉀、硫酸銅、亞甲藍、亞鐵氰鉀等組成，本產品的成分、原理和用途與斐林試劑(Fehling's Reagent)稍有區別。斐林試劑(GB/T 5009.7-2016)主要用于含淀粉食品、酒飲料、碳酸飲料、肉制品、蜜餞等食品中還原糖的定量檢測；總糖的含量也可以測定，但需要提前水解后才能檢測，也可用于還原糖的定性試驗，該方法的檢測原理是試樣經去蛋白處理后以亞甲藍為指示劑，在加熱條件下滴定標定過的斐林試劑(A液與B液等量混合生成的可溶性藍色的酒石酸鉀鈉銅絡合物，也稱作堿性酒石酸銅溶液），樣品中的還原糖將酒石酸鉀鈉銅中的二價銅還原成紅色的氧化亞銅沉淀，氧化亞銅沉淀又與亞鐵氰鉀反應生成可溶性的無色絡合物，當二價銅全部被還原，稍過量的還原糖把亞甲藍還原，溶液就由藍色變為無色，即為滴定終點，根據樣品液的消耗體積計算還原糖含量；本產品未經標定，需客戶自行標定。該試劑僅適用于科研領域，不適用于臨床診斷或其他用途。

自備材料：

1、試管、錐形瓶、容量瓶、玻璃珠

2、水浴鍋、酒精燈等加熱裝置

3、葡萄糖、果糖、轉化糖等還原糖標準(1mg/ml)

4、50%鹽酸水溶液、氫氧化鈉溶液

5、乙酸鋅溶液、亞鐵氰鉀溶液

6、分析天平、酸式滴定管

操作步驟(僅供參考)：

1、Fehling's Reagent 的標定：

25ml的酸式滴定管中加入還原糖標準溶液(1mg/ml)約15ml，向 150ml錐形瓶中依次加入 Fehling's Reagent A 液和B液各 5ml，再向其中加入 10ml水和 2~4 粒玻璃珠，加熱錐形瓶，控制時間在 2min 內沸騰，保持沸騰以每 2 秒 1滴的速度滴加還原糖標準溶液， 直到溶液藍色剛好褪去為終點，記錄消耗標準溶液的總體積，平行操作3次，取平均值， 計算每 10ml Fehling's Reagent(A、B 液各 5ml)相當于還原糖的質量(mg)。

2、試樣準備：

1)含淀粉食品：稱取粉碎或混勻后的試樣 10~20g（精確到 0.001g）置于 250ml 容量瓶中， 加水 200ml,45℃水浴中加熱 1h，并時時振搖，冷卻后加水至刻度，混勻，靜置，沉淀， 吸取 200.00ml 上清液置于另一 250ml 容量瓶中，緩慢加入乙酸鋅溶液和亞鐵氰鉀溶液各 5ml，加水至刻度，混勻靜置 30min，用干燥濾紙過去，棄去初濾液，后續濾液備用。

2)酒飲料：稱取混勻后的試樣 100g(精確到 0.01g）置于蒸發皿上，用氫氧化鈉溶液中和至中性，在水浴上蒸發至原體積的 1/4 后移入 250ml 容量瓶中，緩慢加入乙酸鋅溶液和溶液各 5ml，加水至刻度，混勻靜置 30min，用干燥濾紙過去，棄去初濾液， 后續濾液備用。

3）碳酸飲料：稱取混勻后的試樣 100g(精確到 0.01g)置于蒸發皿上，在水浴上微微攪拌除去二氧化碳后移入 250ml 容量瓶中，用水洗滌蒸發皿，并入容量瓶，加水至刻度，混勻后備用。

4）其他食品：稱取粉碎后的固體試樣 2.5~5g（精確到 0.001g）或混勻后的液體試樣 5~25g

（精確到 0.001g）置于 250ml 容量瓶中，加水 50ml，緩慢加入乙酸鋅溶液和亞鐵氰鉀溶液各 5ml，加水至刻度，混勻靜置 30min，用干燥濾紙過去，棄去初濾液，后續濾液備用。

3、試樣溶液預測：

25ml的酸式滴定管中加入試樣溶液約15ml, 向 150ml 錐形瓶中依次加入 Fehling's Reagent A 液和 B 液各 5ml，再向其中加入 10ml 水和 2~4 粒玻璃珠，加熱錐形瓶，控制時間在 2min 內沸騰，保持沸騰以先快后慢的速度滴加試樣溶液，待溶液顏色變淺時以每 2 秒 1 滴的速度滴加，直到溶液藍色剛好褪去為終點，記錄消耗試樣溶液的總體積。(注：試樣溶液中還原糖濃度過高時，應適當稀釋后再行測定；盡量使每次滴定消耗樣液的體積和標定斐林試劑所消耗的還原糖標準溶液的體積相近，約10ml；當濃度過低時可直接加入 10ml試樣溶液，不再加10ml水，再用還原糖標準溶液滴定至終點，記錄消耗的體積與標定時消耗的還原糖體積之差相當于10ml樣液中所含還原糖的質量。)

4、試樣溶液測定：

25ml 的酸式滴定管中加入試樣溶液約 20ml，向 150ml 錐形瓶依次加入Fehling's Reagent A 液和 B 液各 5ml，再向其中加入 10ml 水和 2~4 粒玻璃珠，加熱錐形瓶，控制時間在 2min內沸騰，保持沸騰以每 2 秒 1 滴的速度滴加試樣溶液，直到溶液藍色剛好褪去為終點，記錄消耗試樣溶液的總體積，平行操作3次，取平均值。

注意事項：

1、試樣溶液中還原糖濃度過高時應適當稀釋后再行測定，盡量使每次滴定消耗樣液的體積和標定斐林試劑所消耗的還原糖標準溶液的體積相近。

2、試樣溶液中還原糖濃度過低時，直接加入10ml試樣溶液，不再加10ml水，再用還原糖標準溶液滴定至終點，記錄消耗的體積與標定時消耗的還原糖體積之差相當于10ml樣液中所含還原糖的質量。

3、也可按上述方法標定 4~20ml 斐林試劑(A、B 液各半)來適應試樣中還原糖濃度的變化。

4、斐林試劑的 A、B 液須分開儲存，臨用前按要求混合使用。

5、斐林試劑B液呈強堿性，需小心操作，B液含有，可消除氧化亞銅沉淀對滴定終點的干擾。

6、該試劑適用于各類食品中還原糖的測定，但在分析醬油等深色樣品時會受色素干擾，滴定終點模糊不清，影響準確性。

7、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

有效期：6 個月有效。