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豬ELISA試劑盒有兩種洗滌方法來分離

更新時間:2022-11-26點擊次數:994
  豬ELISA試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關液體樣本中豬1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)的含量。采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA),往預先包被豬1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并洗滌,用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成黃顏色。顏色的深淺和樣品中的豬1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
  豬ELISA試劑盒靠洗滌來達到分離游離的和結合的酶標記物的目的,通過洗滌以去除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結合的物質,以及在反應過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質。洗滌的方法有兩個。
  一、浸泡式
  1、吸干或甩干孔內反應液;
  2、用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去);
  3、浸泡,即將洗滌液注滿板孔,放置1-2分鐘,間歇搖動,浸泡時間不可隨意縮短;
  4、吸干孔內液體。可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干;
  5、重復操作c和d,洗滌3-4次(或按說明規定)。在間接法中如本底較高,可增加洗滌次數或延長浸泡時間。
  二、流水沖洗式
  初用于小珠載體的洗滌,洗滌液僅為蒸餾水甚至可用自來水。洗滌時附接一特殊裝置,使小珠在流水沖擊下不斷地滾動淋洗,持續沖洗2分鐘后,吸干液體,再用蒸餾水浸泡2分鐘,吸干即可。浸泡式猶如盆浴,流水沖洗式則好比淋浴,且也簡便、快速。已有實驗表明,流水沖洗式同樣也適用于微量滴定板的洗滌。洗滌時設法加大水流量或加大水壓,讓水流沖擊板孔表面,洗滌效果更好。
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