如已固定的組織用一系列陰離子水溶性染料先后或混合染色，則可發現紅細胞被小分子的陰離子染料著染，肌纖維與胞質被中等大小的陰離子染料著染，而膠原纖維則被大分子的陰離子染料著染。由此說明了紅細胞對陰離子染料的滲透性小，肌纖維與胞質次之，而膠原纖維具有很大的滲透性。I型、III型膠原呈綠色，嗜復紅蛋白、腎小管胞質、紅細胞呈紅色。

　　染色試劑盒使用的注意事項：

　　（1）經磷鎢酸分化時須用顯微鏡控制，見肌纖維呈紅色，膠原纖維呈淡紅色即可。

　　（2）如已用10%甲醛液固定，切片可脫蠟至水后，再放入液作用一晚或37℃溫箱內1～2h，然后流水沖洗切片至黃色消失再進行染色。

　　（3）如沒有麗春紅染料，可把酸性品紅加至1克來配制。

　　（4）亮綠染料可用苯胺藍替換，可用來作為對比觀察染色的效果。

　　（5）組織固定起著很重要的作用，根據不同的固定液可延長或縮短染色時間。

　　（6）用1%磷鉬酸處理時可在鏡下控制.見肌纖維呈紅色,膠原纖維呈淡紅色即可。