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人白介素Elisa試劑盒的使用方法和注意事項

更新時間:2022-05-27點擊次數:886
  人白介素Elisa試劑盒靈敏、高校、均勻、吸附性好、回收率高。用雙抗體夾心法測定人白細胞介素水平,純化后的人白細胞介素抗體用微孔板包被制成固體抗體。然后將抗體加入包被的單克隆抗體的微孔中,與HRP標記的IL抗體結合形成抗體-抗原-酶-抗體復合物。清洗后,加入基質TMB顯色。
  一、使用方法:
  1、試劑準備:所有試劑都須在使用前達到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑。實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
  2、加樣:加樣或試劑時,請注意,取樣/標準品、酶復合物或底物時,前孔與后孔加樣的時間間隔過大,會導致“孵育”時間不同,這將顯著影響測量值的準確性和重復性。一次加樣時間(包括標準品和所有樣品)控制在10分鐘以內。如果樣品較多,建議用多通道移液管加樣。
  3、孵育:為防止樣品蒸發,試驗時應將反應板放在一個用濕布覆蓋的封閉箱內,并對酶板進行覆蓋或涂膜,以防液體蒸發;清洗后應盡快進行下一步操作,酶板應隨時保持干燥同時,嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。
  4、洗滌:洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應孔中吸水,同時要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響后的酶標儀讀數。
  5、試劑配制:使用前,檢測A和檢測B應離心幾次或幾次以下,然后再使用,使液體沉積在管壁或瓶蓋上,直至管底。標準品、供試品溶液的工作液a和工作液B應按要求量使用,并用相應的稀釋劑配制,不能混淆。請務必配置好標準液和工作液,盡量不要微量配置(如果檢測液a被吸收,一次不得少于10μl),以免稀釋不準確造成濃度誤差;不要重復使用稀釋后的標準液、工作液a或工作液B。
  6、反應時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請提前加入終止液終止反應,避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數。
  7、底物:底物請避光保存,在儲存和溫育時避免強光直接照射。
  二、使用注意事項:
  1、試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
  2、濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
  3、加樣的每一步都應使用加樣裝置,并應經常檢查其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間應控制在5分鐘以內。如果樣品多,建議使用槍添加樣品。
  4、每次測量時請同時做標準曲線,好做雙孔。如果待測物質含量過高(樣品的OD值大于標準樣品孔一孔的OD值),請用樣品稀釋劑稀釋一定倍數(n倍)后再測量。計算時,請乘以總稀釋倍數(× n× 5)。
  5、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
  6、底物請避光保存。
  7、嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定須以酶標儀讀數為準.
  8、所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
  9、本試劑不同批號組分不得混用。
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