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白介素Elisa試劑盒的標(biāo)本、收集和貯運(yùn)

更新時(shí)間:2021-10-22點(diǎn)擊次數(shù):1184
  白介素Elisa試劑盒以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。
  應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本水平。用純化的抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入,再與HRP標(biāo)記的抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過洗滌后加底物TMB顯色。
  白介素Elisa試劑盒如何標(biāo)本、收集和貯運(yùn)呢?
  1、嚴(yán)峻溶血:以HRP為標(biāo)記的ELISA測定中,殘留在孔內(nèi)的血紅蛋白具有過氧化物酶樣活性,催化底物顯色構(gòu)成假陽性;
  2、混有紅細(xì)胞的血清易沉積或附著在聚Z烯孔內(nèi)不易洗凈;
  3、標(biāo)本凝結(jié)不全,有時(shí)為了爭取時(shí)刻快速檢測,常在血液還未開端凝結(jié)時(shí)即強(qiáng)行離心分離血清,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測定過程中可以構(gòu)成肉眼可見的纖維蛋白塊,易構(gòu)成假陽性成果;
  4、采血試管洗刷不*、重復(fù)運(yùn)用易穿插污染;
  5、塑料試管能吸附抗原物質(zhì),樣本久置在塑料管內(nèi)會(huì)使樣本內(nèi)抗原含量下降構(gòu)成假陰性;
  6、血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測,嚴(yán)峻溶血標(biāo)本禁用。一般說來, 在5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4°C,標(biāo)本在冰箱中保存時(shí)刻過長導(dǎo)致血清lgG聚合,使間接法的試劑本底加深。超過-周測定的需20°C保存。凍住血清融解后,白質(zhì)部分濃縮,散布不均,應(yīng)充沛混勻并避免發(fā)生氣泡。混濁或有沉積的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過濾,澄清后再檢測。重復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)下跌,所以測抗體的血清標(biāo)本如需保存作屢次檢測,宜少數(shù)分裝冰存。
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