僅供科研使用，不可用于臨床診斷和治療

凍存細胞接收后的處理：

1）干冰運輸，收到細胞后推薦直接復蘇，轉入液氮暫存可能導致細胞復蘇率降低；

2）收到細胞后，若發現干冰已經*揮發、凍存管瓶蓋破裂脫落,請立即拍照后與我們聯系。

復蘇細胞接收后的處理：

1）收到細胞后，請首先檢查培養瓶是否破損或漏液，培養液是否混濁，如有漏液及培養液混濁情況請立即拍照把圖片發給我們。

2）75%酒精消毒瓶身后放培養箱中靜置4-6h后，在顯微鏡下確認細胞狀態并拍照100倍和200倍的照片，若有貼壁細胞脫落，可收集上清離心，將沉淀用新的培養基接種至新的培養瓶或培養皿中。

3）建議收到當天不要消化處理，如果細胞長滿90%，可選擇傳代處理。

4）如您收到細胞3天內沒有反饋相關問題，出現的細胞問題將不提供免費重發服務。

注：發貨用培養基不可再次用來培養細胞

細胞培養方法：

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①收集所有細胞懸液，1000rpm離心5min，小心棄去上清；

②用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入T25培養瓶或者60MM培養皿中，補加適量培養基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存

①收集所有細胞懸液，1000rpm離心5min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

②將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。