葡萄糖檢測試劑盒(Folin-Wu 微板法)檢測原理是葡萄糖在加熱的堿性環境中銅離子還原成氧化亞銅沉淀，后者使磷鉬酸還原成鉬藍，使溶液呈藍色，顏色深淺與葡萄糖含量成正比，其最高吸收峰為 420nm，利用酶標儀測定樣品和標準品的吸光度值，通過公式可以計算出樣品的葡萄糖含量，本試劑盒可用于人或動物的血清、血漿、腦脊液、細胞、組織、細胞培養基等樣本中的葡萄糖含量定量測定。本試劑盒僅用于科研領域，不宜用于臨床診斷或其他用途。

產品組成：

自備材料：

1、蒸餾水、PBS、生理鹽水

2、離心管、96 孔板

3、水浴鍋

4、酶標儀

操作步驟(僅供參考)：

1、樣本處理：

①血清、血漿、腦脊液樣本：從待測樣本中分離出的血清或血漿不應有溶血，一般需要去除蛋白質(即為無蛋白血濾液)后再經檢測。取抗凝血 0.1ml，加入 0.7ml 蒸餾水和 0.1ml 蛋白酸化液，混勻，緩慢加入 0.1ml 蛋白沉淀液，邊加邊搖勻，至出現暗紅色蛋白質沉淀，靜置 10min，3000g 離心 5min，取上清液即為無蛋白血濾液，4℃保存備用。

②組織樣本：準確稱取適量組織樣本，按質量(g)：生理鹽水或 PBS(ml)=1：9 的比例，加入生理鹽水或PBS，冰浴條件下手動或機械勻漿，2500~3000g 離心 10min，取上清待用。

③細胞樣本：

a、取適量的細胞(一般推薦>106 以上)，1000g 離心 10min，棄上清，留取沉淀。b、用 PBS 或生理鹽水清洗 1~2 次，1000g 離心 10min，棄上清，留取沉淀。

c、加入 200~300μl 的 PBS 或生理鹽水勻漿，冰浴條件下超聲破碎細胞，功率 300W，每次 3~5s，間隔 30s，重復 3~5 次。亦可手動勻漿，制備好的勻漿液不可離心；亦可用 1~2% Triton X-100 冰浴 30~60min，制備好的裂解液不可離心。

2、制備 Glu 標準應用液（0.55mmol/L）：取 10ul Glu 標準儲存液(55mmol/L)，補加蒸餾水或者無菌水 990ul，充分混勻即可。根據需用量，臨用前按比例配置，不宜久存。

3、Glu 加樣：按照下表設置空白管、標準管、測定管，溶液應按照順序依次加入，并注意避免產生氣泡，如果樣品中的 Glu 濃度過高，可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定。

充分混勻, 置于沸水浴煮沸 8min，取出，在冷水中冷卻，注意不能搖動，靜置 10min， 分別加入 750μl 蒸餾水。

4、Glu 測定：取 200μl 上述溶液，加入 96 孔板中，以空白孔調零，用酶標儀在 420nm 處讀取標準孔和測定孔的吸光度。

計算：葡萄糖含量(mmol/L)=(測定管吸光度/標準管吸光度)×0.55×10

=(測定管吸光度/標準管吸光度)×5.5 其中 10 為去蛋白樣品的稀釋倍數

注意事項：

1、 待測樣本如不能及時測定，應置于 2~8℃保存，3 天內穩定。

2、 上述低溫試劑避免反復凍融，以免失效或效率下降。

3、 Glu 標準應用液臨用前按比例配置，不宜久存。

4、 如樣品吸光度值偏大，則需再次稀釋后重新檢測。

5、 樣品中含有蛋白等干擾物質時，須用去蛋白的方法處理后再行檢測。

6、 煮沸時不能動搖。

有效期： 6 個月有效。4℃運輸，4℃保存。